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    紀寧實業|細胞培養出現污染怎么處理?
    瀏覽次數:141發布日期:2023-10-17

    培養細胞可不是一件簡單的事,一不小心就出現污染的情況,捧著被污染的細胞感嘆∶細胞真是太難養了。細胞一旦污染就很難救回來,更嚴重的是一個細胞的污染可能會導致實驗室內細胞全部受到影響。下面,帶大家了解一下出現污染后的應對方法。

    1.細菌污染

    細菌在普通倒置顯微鏡下呈黑色和細砂狀。根據感染菌的種類不同,可能會呈現不同的形狀,培養液一般會變得渾濁、黃色,對細胞生長有明顯影響。

    解決方法:仔細檢查器具的滅菌情況,確保通風時間和高壓滅菌器的壓力是否足夠。重要的是,與培養基接觸的移液管等物品如果被污染兩次s則可能會導致儲存溶液也受到污染。所以一定要注意!下次使用要檢查培養基的渾濁度。此外,建議在培養基中添加抗生素。

    2.支原體污染

    支原體是隱藻的污染物,不能通過過濾去除。顯微鏡下沒有任何可見的支原體污染跡象﹐比如細胞病變和濁度或p值變化《即使在嚴重污染的培養基中>﹐這樣就會導致我們產生錯誤的安全感。而在牛血清中,支原體是常見的微生物。

    解決方法:通常的過濾滅菌方法對支原體沒有影響。細胞一旦被支原體污染>特別是對重要的細胞系,必須去除支原體,一般的方法有抗生素治療﹑抗血清治療和抗血清與補體聯合治療。值得注意的是,支原體突出的結構特征是沒有細胞壁。因此,它對作用于細胞壁的生物合成抗生素(如β-內酰胺類等>不敏感,并且通常對多粘菌素和磺胺類藥物具有耐藥性。相反,四環素類和大環內噩類抗生素對支原體的抑制作用強,而氨基糖苷類的抑制作用較弱。

    3.黑點污染

    黑色的游動點能穿透濾膜并在空氣中擴散。它們在低倍鏡下顯示為黑色圓點,在高倍鏡下顯示為可移動的黑色斑點。培養液也不渾濁,一般影響較小,因此細胞仍可使用。通常,黑點污染后,細胞生長良好,運動物體無明顯增加·培養基的顏色和逶明度無明顯變化·在同一批血清培養的細胞中也可以發現類似的現象。

    解決方法:黑點對細胞生長狀態沒有明顯影響,細胞增殖后會自然消失,因此除了血清置換外,無需特殊處理。如果細胞可能被小的運動點污染,建議增加培養皿細胞密度,以提高細胞存活率。

    4.真菌污染

    真菌污染后,培養基一般清激,保持原色。細絲可以在顯微鏡下觀察到。初,一些真菌類似于死細胞碎片,但其中許多清晰可見,看起來像珊瑚>比較容易區分。此外,它們會慢慢長出細細的黑色細絲,因為它們生長得比較慢,不像細菌那樣容易被發現,一旦發現培養基禎污染s它們將很難存活。

    解決方法:一旦被真菌污染,果斷丟棄,然后對細胞房、CO2培養箱、器皿和培養基進行消毒。

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